(資料圖片僅供參考)
1、LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實驗中一般用該培養(yǎng)基來預培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴增,達到使用要求.可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
2、液態(tài)培養(yǎng)基根據(jù)《分子克隆實驗指南》(J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾著)配制每升培養(yǎng)基,應該在950 ml去離子水中加入:胰蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl 10g搖動容器直至溶質溶解.用5mol/LNaOH調pH至7.0.用去離子水定容至1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過改造的無法在外界環(huán)境單獨存活和擴增的工程菌.通過培養(yǎng)工程菌,我們可以表達大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質粒,工程菌的有效擴增是生化分子實驗的基礎。
3、LB培養(yǎng)基的配方如下:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L酵母提取物(Yeast extract) 5g/L氯化鈉(NaCl) 10g/L另外根據(jù)經(jīng)驗值用NaOH調節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達到7.4(該pH適合目前使用最廣的原核表達菌種E.coli的生長)固態(tài)培養(yǎng)基LB固體培養(yǎng)基1L和液體一樣,加15g~20g瓊脂粉,一定要在溫度降下之前加好抗生素,并且倒好板。
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